罗丹明在金胺染色中的作用(罗丹明B染色原理)

罗丹明B染色原理

潮汕雪粉是一种原粉。雪面粉是一种生面粉。以优质中高筋混合小麦为原料，精制加工而成。

潮汕粿是一种以各种蔬菜为原料制成的小吃。野生有趣的老鼠曲粿等。

俗称花红粉，正式名称为罗丹明B（RhodamineB）是一种红色碱性荧光染料，俗称玫瑰红、玫瑰精华，具有光亮 主要用于毛、丝等织物的染色。摄入后会刺激眼睛、鼻子、喉咙、肺、肠，影响中枢神经系统，对人体有致癌作用。目前，其在食品中的使用已被禁止。

罗丹明B染色溶液的配制

罗丹明是合成化工染料，一些日用塑料制品有用罗丹明b染色的；罗丹明不是食品添加剂着色剂，目前有些企业生产的辣椒红或者辣椒油树脂，由于加工环节控制不好，会收到罗丹明b的污染，特别是印度进口的辣椒红或者辣椒油树脂，被罗丹明b污染的程度更加严重。

罗丹明b是酸性染料吗

扯淡。罗丹明B是杂环碱性染料，跟偶氮结构毫不相干。

罗丹明染色剂

防冻液一般有三种颜色蓝、黄、绿等，防冻液有乙二醇、丙二醇和甘油型，市场上防冻液主要以乙二醇的为主，乙二醇沸点高、冰点低，防冻液还添加有染色剂，常用的是荧光素，添加到乙二醇内，颜色呈绿色。

除此之外，有用罗丹明b染色剂的，添加到乙二醇内的颜色是粉红色，还有用次甲基蓝染色剂的，添加到乙二醇内的颜色是蓝色。防冻液是一种添加有特殊添加剂的冷却液，所以，防冻液又叫冷却液，还具有冷却作用。防冻液颜色的不同，只是代表成分不同，但是功效都是一样的。也就是说，防冻液的颜色不同，在本质上是没有区别的。

罗丹明染色是什么颜色荧光

荧光是物质吸收光照或者其他电磁辐射后发出的光。大多数情况下，发光波长比吸收波长较长，能量更低。但是当吸收强度较大时，可能发生双光子吸收现象，导致辐射波长短于吸收波长的情况发生。当辐射波长与吸收波长相等时，即是共振荧光。

常见的例子是物质吸收紫外光，发出可见波段荧光，我们生活中的荧光灯就是这个原理，涂覆在灯管的荧光粉吸收灯管中汞蒸气发射的紫外光，而后由荧光粉发出可见光，实现人眼可见。

扩展资料：

许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：

1、异硫氰酸荧光素（FITC）：为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。其主要优点是：人眼对黄绿色较为敏感；通常切片标本中的绿色荧光少于红色。

2、四乙基罗丹明（RB200）：为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。

3、四甲基异硫氰酸罗丹明（TRITC）：最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。

4、藻红蛋白（R-RE）：本品为无定形，褐红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮，性质稳定，可长期保存。最大吸引光波长为565nm，最大发射光波长为578nm，呈明亮的橙色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，故被广泛用于对比染色或用于两种不同颜色的荧光抗体的双重染色。

罗丹明B是什么性质的染料

SRB检测方法的原理

磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B，SRB)比色法，主要用来检测细胞增殖情况。SRB是一种粉红色阴离子染料，易溶于水，在酸性条件下可特异性地与细胞内组成蛋白质的碱性氨基酸结合；在540 nm波长下产生吸收峰，吸光值与细胞量成线性正相关，故可用作细胞数的定量检测。SRB染色后不会像MTT法那样很容易变色，细胞固定染色后在96孔板中可以放置较长时间，因而受测定时间的影响较小。用Tris-base溶液溶解的SRB也可稳定较长时间。因此不同时间点固定的96孔细胞培养板可在同一时间测定，测定的吸光值结果不会受到明显影响。吸光值与SRB浓度作图时，在OD单位1.5—2.0以下为线性，当超出线形范围时，最好稀释后重新读数。虽然SRB法比其他检测方法操作步骤繁琐，但是由于时间可以自己掌握，不受限制，因此适用于高通量筛选。

操作步骤

2.SRB检测的操作步骤

1)细胞固定：药物作用时间终点时，每孔加入50μL4℃预冷的TCA溶液(30%，w/v)固定细胞，TCA溶液的终浓度为10%。静置5 min移入4℃冰箱中固定1 h，取出用去离子水冲洗5遍，室温晾干。

2)染色：待96孔板室温下晾干后，每孔加入0.4%(w/v)的SRB染液(1%的乙酸配制)70μL，染色30 min后倒掉染液，用1%(v/v)乙酸冲洗4次，去除未结合的染料，室温晾干。

3)检测：用100μL非缓冲Tris-base碱液(10mM，pH=10.5)溶解与细胞蛋白结合的染料，水平摇床上振荡20min，采用酶标仪540nm处测定光吸收值。操作中，应注意洗除染料时操作需迅速，避免用移液器吸取液体，防止动作过慢造成与细胞蛋白结合的染料解吸附。

计算公式

3.SRB检测的计算公式

根据美国国立癌症研究所(National Cancer Institute，NCI)关于SRB检测的介绍，细胞增殖百分率的计算存在以下两种情况：

1)Tx-T0>0，

PG=100×(Tx-T0)/(C-T0)

2)Tx-T0<0，

PG=100×(Tx-T0)/T0

其中，

T0：药物作用前的细胞经过固定、染色后测得平均吸光值；

C：培养基中加有等体积的DMSO，没有药物作用的阴性对照的平均吸光值（阴性对照）；

Tx：药物作用终点时细胞经过固定、染色后测得平均吸光值。

PG即Percentage Growth，是指药物作用的样品孔与阴性对照孔中细胞增殖量的百分率。